化学发光分析的基本原理

化学发光是吸收化学反应过程产生的化学能，而使反应产物分子激发所发射的光。任何一个化学发光反应都应包括化学激发和发光两个步骤，必须满足如下条件: ①化学反应必须提供足够的激发能，激发能主要来源于反应焙； ②要有有利的化学反应历程，使化学反应的能量至少能被一种物 质所接受并生成激发态； ③激发态能释放光子或能够转移它的能量给另一个分子，而使该分子激发，然后以辐射光子的形式回到基态。

磷光分析仪

在荧光分光光度计上配上磷光配件后，即可用于磷光测定。如将样品放在盛有液氮的石英杜瓦瓶内，即可用于低温磷光测定。

什么是室温磷光

由于低温磷光需要低温实验装置，溶剂选择的限制等因素，从而发展了多种室温磷光法(RTP)。

什么是低温磷光

由于激发三重态的寿命长， 使激发态分子发生T1→So这种分子内部的内转化非辐射去活化过程，以及激发态分子与周围的溶剂分子间发生碰撞和能量转移过程，或发生某些光化学反应的概率增大，这些都将使磷光强度减弱，甚至完全消失。为减少这些去活化过程的影响，通常应在低温下测量磷光。

分子荧光分析法及其应用

荧光分析方法的特点 ①灵敏度高:②选择性强:③试样量少和方法简单:④提供比较多的物理参数。 荧光分析法的明点是它的应用范围小。因为本身能发出荧光的物质相对较少，用加人某种试剂的方法将非荧光物质转化为费光物质进行分析，其数量也不多:另方面，由于荧光分析的灵敏度高，测定对环境因素敏感，干扰因素较多。

荧光分析仪

用于测量荧光的仪器由激发光源、样品池、用于选择激发光波长和荧光波长的单色器以及检测器四部分组成。

导致荧光猝灭的主要类型

碰撞猝灭是指处于激发单重态的荧光分子与猝灭剂分 子相碰撞，使激发单重态的荧光分子以无辐射跃迁的方式回到基态，产生猝灭作用。静态猝灭(组成化合物的猝灭)是由于部分荧光物质分子与猝灭剂分子生成非荧光的配合物而产生的。此过程往往还会引起溶液吸收光谱的改变。

影响荧光强度的因素

溶剂对荧光强度的影响。溶剂的影响可分为一般溶 剂效应和特殊落剂效应。一般溶剂效应指的是溶剂的折射率和介电常数的影响。特殊溶剂效应指的是荧光体和溶剂分子间的特殊化学作用，如氨键的生成和化合作用。

光的镜像规则

通常荧光发射光谱和它的吸收光谱呈镜像对称关系。 吸收光谱是物质分子由基态激发至第一电子激发态的各振 动能级形成的。其形状决定f第一电子激发态中各振动能级的分布情况。荧光光谱是激发分子从第一电子 激发态的最低振动能级回到基态中各不同能级形成的。

激发光谱曲线和荧光、磷光光谱曲线

荧光和磷光均为光激发(光致)发光，因此必须选择合适的激发光波长，可根据它们的激发光谱曲线来确定。绘制激发光谱曲线时，固定测量波长为荧光(或磷光)最大发射波长，然后改变激发波长，根据所测得的荧光(磷光)强度与激发光波长的关系，即可绘制激发光谱曲线。