液相色谱用仪器组成
抖化学 / 2022-11-05
溶剂贮槽
溶剂贮槽应具有250毫升的容量，”最好配有干燥管以防止溶剂从大气中吸水。贮槽可用玻璃或不锈钢制成，但如用玻璃的则应为琥珀色，以防止吸收紫外线而引起氯代烃的分解。
溶剂泵
溶剂泵有两种类型一一注射型或振动隔膜或活塞型。后一种类型较好，因其在更换溶剂时易于清洗，从而减少了溶剂的消耗。
隔膜或活塞型泵还可在泵前低压产生梯度，而且可对梯度系统使用任何种数的溶剂。另方面，注射泵类则每种溶剂就要求有一个泵。活塞或隔膜型阀的泵容量应为100~200微升，并在入口压力高达35兆牛顿/米²(5000磅/英寸²)时提供0.1到10毫升/分
的流速。为了制备工作而使用大口径柱子时，泵只须产生14兆牛顿/米²(2000磅/英寸²)的压力，但需提供高达100~ 150毫升/分的流速。
注样装置
基本上有两种类型的注样系统一注射 器或样品阀。注射器采用一个橡皮隔膜，可工作于高达14兆牛顿/米² (2000磅/英寸²)，并可用来直接注入填充物内，这样可以得到最高的柱效。但此方法有可能扰乱填充物顶部，所以常在填充物顶部放置- -块
多孔的烧结材料，样品即注在此烧结材料上。这种注样方法提供重现性较好的结果，但效率稍低。可 得到能工作于高达42兆牛顿/米(6000磅/英寸²)的进样阀。这类进样阀更易于操作，与样品注射在多孔烧结料上产生相同的理论塔板数，给出重现性很好的结果，因此对于重复的分析是理想的。
柱
推荐使用长度100、250或500毫米和外径6.85毫米(1/4英寸)或更大的色谱柱。这些柱填充了微粒固定相时，在纯分析性分离和利用几个毫克溶质的半制备性分离之间提供了良好的折衷。一根填充了10微米硅胶或键合相的250毫米柱，至少应得到5000
理论塔板，即每米20000理论塔板数。如果采用薄壳填充物，则应采用较长的柱和更小的直径。例如对于薄壳离子交换介质，通常采用内径1.59毫米( 1/16英寸)的1米柱子。
检测器
对液相色谱法的一般工作有三种检测器:紫外检测器、移动丝检测器和折光率检测器。
单波长或双波长紫外检测器
这种检测器最常用，具有的最高灵敏度在信噪比2的时候约为10~8克/毫升。灵敏度变动于10~7和10~9克/毫升之间，取决于所测物质的消光系数。该检测器可用于梯度洗脱，但选择的溶剂只限于在所采用波长处不具明显UV发色团的那些物质。检测器的缺点是不能检出在UV区没有吸收的物质,因此不能检测出样品中未知数目的组分或甚至已知共存在的组分。这种检测器是比较便宜的。
移动丝检测器
这种检测器体积大、昂贵并最难操作。然而，它能检出柱中流出的所有非挥发性含碳物质，其响应值大致与溶质的含碳量成正比。其结果是用这一检测器所得到的色谱图，在不同的洗脱溶质之间给出定量关系的正确效果。当用于梯度洗脱时，任何极性度或任何化学结构的溶剂均可采用,唯一的条件是它们较易挥发。这种检测器的灵敏度约为10~8克/毫升，因而比UV检测器稍差。
折光仪检测器
这一检测器是所有LC检测器中灵敏度最低的(约10~5克/毫升)，且只能有效地用于等强度展开的条件。它是三种检测器中最便宜的，当前的应用主要限于制备液相色谱。
上述检测器是最常使用的，全都具有线性响应，能用作定量分析。填充以微粒固定相的柱子，可提供10000~20000理论塔板的效率一在此情况下， 检测器的死体积极 端重要。如果检测的体积很大，引起的谱带扩展可能妨碍实现柱子固有的较高效率。
因此，建议无论是UV检测器还是折光仪检测器，它们的检测池体积不应大于8微升，最好更小些(见附录I)。
色谱仪的形式
色谱仪所取的形式，可为整机式或分开的单个积木组装式。整机式简单，但是昂贵，且不易装人新的或另外的设备，所以它是有限制的。积木式色谱仪需要一个贮槽、泵、注样头和柱，检测器及其附属电子设备，还有记录仪。这样一个连结起来的系.
统，就是一台非常灵便的色谱仪，使能快速有效地装入不同的或新的装置。对这种系统的一个谬误的印象是它的组装需要有仪器制造的知识。事实上，只要求化学家连结和拧紧半打的Swege接头或类似的接头以使之运转。
.jpg "液相色谱用仪器")
闽ICP备15011996号-4
|
闽公网安备32011202000099号
|
