氧化铝活度测定法(薄层色谱法)的实验
实验室k / 2019-08-08
一、目的
(1)掌握薄层软板的制备方法。
(2)熟悉薄层色谱的一般操作方法。
(3)掌握用薄层软板测定氧化铝活度的方法。
二、仪器与试剂
(1)仪器：色谱缸(25×6.5x3cm)、玻璃板(3×20cm)、毛细管(Φ0.5mm)、量筒、玻璃棒；
(2)氧化铝：过180目筛的细粉(如180～220目)；
(3)四氯化碳：10ml；
(4)五色染料：称取偶氮苯60mg，对甲氧基偶氮苯40mg，苏丹黄、苏丹红、对氨基偶氮苯各20mg，置于50ml容量瓶中，加四氯化碳(经NaOH干燥后重新蒸馏)溶解并稀释至刻度、摇匀。
三、实验步骤
1.氧化铝软板的制备——干法铺板 将待测氧化铝撒在洁净的玻璃板(3×20cm)的一端(玻璃板下面可垫一张白纸)，另取比玻璃板宽度稍大的玻璃管，在管的两端各绕几圈塑料丝，其距离即为薄层的宽度，其厚度即为薄层的厚度(以0.5～1mm为宜)。在塑料卷的外侧可套上一小段橡皮圈作为固定边，双手均匀用力，推挤氧化铝至玻璃板的另一端，使成一均匀平坦的薄层。
2.点样、展开 取氧化铝薄层板一块，距一端2.5cm处作为起始线(可用细针轻轻接触起始线边缘部分作为标记，但不要戳穿)。取毛细管一根，点加五色染料0.02ml于起始线中点。在色谱槽内放入10ml四氯化碳。将点好样的氧化铝薄层板点样的一端浸入展开剂中，浸没深度约为0.5cm，倾斜角度为15～20°。待展开剂到离起始约15cm时(约需10min)取出。观察各染料的位置和颜色，测定比移值，根据下表确定氧化铝的活度。
氧化铝活度的薄层定级法
|
活度级
偶氮染料
|
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
Ⅴ |
| 偶氮苯 |
0.59 |
0.74 |
0.85 |
0.95 |
| 对甲氧基偶氮苯 |
0.16 |
0.49 |
0.69 |
0.89 |
| 苏丹黄 |
0.01 |
0.25 |
0.57 |
0.78 |
| 苏丹红 |
0.00 |
0.10 |
0.33 |
0.56 |
| 对氨基偶氮苯 |
0.00 |
0.03 |
0.08 |
0.19 |
四、注意事项
(1)铺板时，用力要均匀，推移不宜过快，也不能中途停顿或来回反复，否则厚薄不均匀。
(2)软板薄层硫松，很不牢固，稍受震动或经风吹就会把薄层破坏，因此在点样、展开、显色等操作中都要特别小心。
(3)点样要轻，尽量避免出坑；操作越快越好，尽量防止吸收水分。
(4)量筒不要混用(尤其是量水用的量筒)。
(5)氧化铝称量时要快，称后盖严。
五、思考题
1.根据苏丹黄及苏丹红结构上的差异(极性大小)，试解释用四氯化碳作展开剂时为什么苏丹黄的Rf值大于苏丹红？
2.用氧化铝软板分离混合物，是属于哪一种层析原理？
3.制备氧化铝软板应该注意哪些问题？
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