生物碱的薄层色谱实验
实验室k / 2019-08-08
一、目的
(1)掌握薄层硬板的制备方法。
(2)掌握薄层色谱的一般操作方法。
(3)了解薄层色谱在分离、鉴定方面的应用。
二、提要
喹啉衍生物类生物碱可用薄层色谱法分离、鉴定。例如：
可用下列展开剂进行展开。
丙酮-甲醇-二乙胺(5：5：1)
苯-乙醚-二乙胺(8：5：2)
氯仿-二乙胺(9：1)
氯仿-乙醇(9：1)
本实验选用奎宁和辛可宁作试样，苯-乙醚-二乙胺(8：5：2)作展开剂，用改良碘化铋钾试剂显色。
三、仪器与试剂
(1)仪器：色谱缸、玻璃板(3×20cm)、毛细管、喷雾器、乳缽、电吹风、天平。
(2)试剂：0.5％奎宁的氯仿溶液、0.5％辛可宁的氯仿溶液、待检样品、苯-乙醚-二乙胺(8：5：2)、改良碘化铋钾试剂、硅胶G。
四、实验步骤
1.硅胶G板的制备 称硅胶G1.5g置乳缽中，加水约3.5ml，轻轻研匀(约1～1.5min)，立即倒在整块玻璃板(3×20cm)上，用乳缽研头(或玻璃棒)稍加涂匀，随后就用左手持玻璃板，用右手中指在背面轻轻敲击玻璃板，使铺成平坦均匀的薄板。立即放在水平台面上静置，使其自然干燥。用同样方法再制一块。然后于110℃烘箱中活化1/2～1h，置于干燥器中备用。
2.点样 取薄板二块，在距一端3cm处，用细针在两侧戳几个点，作为起始线。分别按下面点样：
端距：3cm；点距：1.5cm；点样量：1～2次；点直径：2～3mm。
3.展开 在色谱缸中放入展开剂7.5ml，将薄板放入色谱缸中，密闭，待饱和后(约10min)，展开，展开剂浸没薄板下端的深度为0.5cm。待展开剂前沿离起始线约10cm时，(约需60min)取出，立即用铅笔划出前沿，用电吹风吹干(可吹薄板的背面)。
4.显色 在薄板上喷以改良碘化铋钾试剂，用铅笔标出斑点的位置，并记录斑点的颜色。
5.定性 分别测量Rf值，鉴别待检样品，是奎宁还是辛可宁。
五、思考题
1.影响吸附薄层色谱Rf值的因素有哪些？
2.在操作中应该注意哪些问题？
3.试比较比移值和相对比移值的优缺点。
4.奎宁和辛可宁，哪个Rf值大？为什么？
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