羧酸的酰肼类和具有自由－NH₂基团的肼及其衍生物相似，因它們含有－CO－NH－NH₂基团，所以都是会和醛类及酮类縮合的。例如，它們和水楊醛的一般反应如下：

所产生的腙类，其結构和具橙-黄色萤光并不溶于水的二水杨醛连氮相似，亦是不溶于水，在紫外光下发出强烈的萤光（黄-绿色到蓝-绿色）。反应（1）的縮合产物因含有酚型－OH基团，一如水杨醛及二水杨醛連氮，可溶于氨而成黄色的溶液。其縮合产物对稀酸（二水楊醛连氮是不溶的）的性行，似要取决于R基或芳基的本性。有些腙类不溶或略溶于稀酸（例如水楊肼所形成的产物），有的被酸溶解而不分解（例如三种同分异构的吡啶羧酰肼所形成的产物），有的却会被酸分解（例如苯酰肼和水杨醛的縮合产物）。反应（1）的实現及酸类对这一反应所形成腙类的作用，就使肼的分裂出来成为可能，这肼又会和水楊醛縮合产生酸稳定而发萤光的二水杨醛連氮。

       酰肼类和水杨醛的直接縮合，可使成为酰肼类的一般试验法，但需要有一中性介质或弱碱性的氨介质。可是由于水楊醛的氨溶液有黄-绿色的萤光，这就不可能由此直接检定小量的氨溶缩合产物，因它們也是会发出蓝-绿色或黄-绿色萤光的。如将酰肼与水杨醛的混合物一滴，用氨少許处理后，再放在滤紙上，这种干扰就可防止。在这种情况下，氨-水楊醛的萤光可在数分钟内消失掉，而水楊醛和酰肼类縮合产物所生的萤光，仍旧可以持续存在。但此萤光的强度会逐漸减小，在小量时会完全消失。如将斑点持向氨上，又会立即恢复。这是点滴试验中有时遇到的效应之一例，也就是紙上斑点反应特别灵敏而可靠的地方，因此，紙的作用似是反应中一个活泼的参加者。在本例中，事物的过程是水杨醛的氨溶液，放于紙上后，由于酚盐的失氨，就留下了水楊醛；水楊醛或不从紙的表面上揮发出去，或因高度分散而被空气很快地氧化为水楊酸。这种說法得到了下例事实的支持：如将水楊醛的饱和水溶液一滴放在滤紙上，立刻用氨处理，就有黄-绿色的螢光斑点产生，但很快地就消逝了。若过了3～4分钟，再用氨处理，就不发生螢光。
       操作手续    将酸性或中性試液一滴与水楊醛的溶液一滴混和后，移到滤纸上。过了3～5分钟后，将紙放在氨水上面，立刻在紫外光下检视。斑点上的藍-绿色或黄-绿色的螢光，即表示酰肼的存在。数分钟后，萤光消逝，但重行暴露在氨水上面，又可以再生。
       試剂：9毫升水楊醛饱和水溶液，用前以1毫升冰醋酸使其酸化。
       这个操作手续，用下列各物，可給出正反应：

       环状3－氨基酞酰肼不起反应。对－硝基苯（甲）酰肼沒有反应；此或因－NO₂基团的一种熄灭萤光效应所致。