形成吡咯检测琥珀酸的试验法
       琥珀酰亚胺和金屬锌同受干热时会形成吡咯（锌粉蒸馏法）。琥珀酸铵由于干热时会转变成琥珀酰亚胺，其性行正相类似：

从反应（1）和（2）的連续过程中所产生的吡咯，可在蒸气相中，由其和对－二甲胺基苯（甲）醛的酸性溶液所产生的红-紫色来作出檢定。因此琥珀酸的試驗法就可用这显色反应作为基础。
       为了要达到最大的灵敏度，锌粉蒸馏法应在有氯化铵存在之下进行，而以使用对－二甲胺基苯（甲）醛的三氯醋酸溶液胜于使用其盐酸溶液。氯化铵可以通过反应：

ZnO+2NH4Cl → ZnCl2+H2O+2NH3

使氧化鋅膜从金屬鋅的表面上除掉，因而使反应（2）順利地进行。利用三氯醋酸（沸点197°）代替盐酸的水溶液（沸点110°），可以保証吡咯反应中有一热稳定介质，这是盐酸溶液所不可能的，因为鋅粉蒸馏是需用高温的。
       値得注意的是琥珀酸在和氯化铵与鋅受干热时也会产生吡咯，因而它的性行和琥珀酸铵及琥珀酰亚胺相似，亚胺是在燒結反应中通过琥珀酸铵来形成的：

因此，有可能在有氯化铵存在之下，用锌粉蒸馏法来形成吡咯，以檢定琥珀酰亚胺与琥珀酸。
       操作手续    用一微量試管，将試液一滴或固体的一小部份和0．5％氯化铵溶液一滴及锌粉数毫克一起蒸发至干。管口盖以一小片曾用5％对－二甲胺基苯（甲）醛在20％三氯醋酸苯溶液中的溶液潤湿过的滤紙。用微焰在試管底部强烈加热約1分钟。视琥珀酸或琥珀酰亚胺的量，紙上将出現紅-紫或粉紅色斑点。
       鉴定限度：5微克  琥珀酸
       上述試驗不能直接用于有苹果酸或草酸存在时。苹果酸在所規定的条件下会形成揮发的羟基吡咯，对于对－二甲胺基苯（甲）醛的性行和其母体化合物相似。草酸和氯化铵一起干热时，起初形成草酸銨，然后形成草酰胺。草酰胺被初生态氫还原成乙（撑）二胺，而在热解时也会产生吡咯。

用β－萘酚和硫酸检测苹果酸的試驗法
       苹果酸HOOC・CHOH・CH2・COOH和含少许β－萘酚的浓硫酸加热时，发出蓝色的萤光。这个反应的化学原理尚未明了。可能是苹果酸被濃硫酸分裂（磷酸的性行相似）而产生一种醛，然后再和β－萘酚縮合。
       下列諸酸不起干扰：草酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、肉桂酸、苯（甲）酸、水楊酸、醋酸、甲酸。数种羟基酸，如乙醇酸及酒石酸会引起强弱不同的绿色螢光。
       操作手续    如在兼含柠檬酸、酒石酸、草酸、琥珀酸等钙盐的混合沉淀中检定苹果酸根离子，可取沉淀少許或其稀硫酸的溶液一滴（硫酸钙可借过滤或离心法移去）提供试验。試料可用β－萘酚試剂一毫升处理，并在水浴上加热片时，如有苹果酸存在，出現黄的颜色和蓝色的螢光。
       如用苹果酸或其盐类的稀溶液时，最好加入草酸盐少許，然后加入醋酸钙。草酸鈣沉淀的功用为微量苹果酸鈣的收集剂。如苹果酸的含量不是太小，即使有硫酸鈣存在，在β－萘酚作用后所发生的萤光，肉眼仍能見到。
       試剂：0．0025克β－萘酚在100毫升96％硫酸中的溶液。
       鉴定限度：10微克  苹果酸