氯仿、溴仿、碘仿或氯醛，和吡啶及苛性碱溶液温热片刻，即会产生紅色。其它多卤化合物也观察到有类似的显色反应，并曾用于检定及比色测定，只是至少有两个卤素原子結合着一个碳原子的卤化合物，才有活性。其水溶红色反应产物，可能是戊烯二醛的希夫氏碱类；它們的形成是由于多卤化合物加成于环氮原子上后而打开了吡啶环。这个多卤化合物如为氯仿，其反应可能为：
这个可以适用于其它多卤化合物的反应方式，获得了事实的支持：即醋酸加入于紅色的溶液，可使它变为黄色，此后再加入芳族伯胺，如联苯胺，可产生吡啶試驗所得戊烯二醛的紫色希夫氏碱沉淀。
現在已经研究过的事例，还不足以允許对这个試驗法的选择性有所論述。基本上可以预料，不仅多卤化合物，而且含有活动性卤原子的一卤化合物，也能和吡啶有加成反应，且因而会随即分裂来生成戊烯二醛的有色衍生物。
操作手续 用一微量試管，将試液一滴（不溶于水的化合物可用丙酮为溶剂），用吡啶两滴与5N氢氧化钠一滴处理。試管放入沸水中。按活性化合物存在量的多少，数秒或数分钟内将有红色或粉红色在吡啶层中出現。延长加热，会使颜色消失或变为棕色或黄色。如果加入联苯胺盐酸盐少許，并用稀醋酸使混合物酸化，就可获得紫色或沉淀。
下列各物量可被檢出：
| 1微克 氯仿 | 5微克 溴仿 |
| 50微克 碘仿 | 0.5微克 三氯醋酸 |
| 0.5微克 水合氯醛 | 2.5微克 四氯化碳（工业原料）① |
下列各物給出强烈反应：氯霉素、三氯乙烯、三溴乙醇。
下列各物无反应：六氯乙烷和滴滴涕〔双－（对氯苯基）三氯乙烷〕。
① 晚近的研究工作指出，吡啶试验的正反应系由于CCl4内的沾污物，最大可能是CHCl3的沾污。小心精制过的CCl4并无反应。
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