链霉素及二氢化链霉素的试验法
经常在市上出售的碱性的抗菌素链霉素有几种形式:盐酸盐C21H39N7O12·3HCl;盐酸盐和氯化鈣的复盐(C21H39N7O12·3HCl)2·CaCl2;磷酸盐C21H39N7O12·H3PO4;或硫酸盐(C21H39N7O12)2·3H2SO4。鍵霉素碱的結构如下:
二氫化链霉素系由链霉素氢化制得,它含有伯醇基团-CH2OH以代替链霉素的中心醛基-CHO。它在市上常以盐酸盐或硫酸盐的形式出售。
結构式指出,鏈霉素与二氫化鏈霉素可視作从胍衍生而成。这些化合物在加热至250°时,都产生氨。和双乙酰及氧化鈣加热时,也給出紅-橙色。这些特性在鏈霉素的盐类中仍然存在,并可用于它的檢定。通常的无机試驗法也可用来显示它們的盐酸盐、磷酸盐或硫酸盐有否存在。
链霉素盐酸盐和氯化鈣复盐的存在,可以用1%玫棕酸鈉的氨溶液一滴,滴試固样試样少許,出現紫色不溶的玫棕酸鈣。
推荐用下面的操作手续鉴定链霉素。这个反应的化学原理尙未明了。
操作手续 約0.5毫克的試样,放于一微量坩埚内,溶入一滴水中。加入1N氫氧化鈉一滴后,将混合物放在水浴内温热历5分钟。冷却后,加入100毫克硫酸鉄铵在5毫升1N硫酸内的溶液一滴,即产生紫-紅色。二氢化鏈霉素至多只能产生粉紅色。
氯霉素的检定法
氯霉素(2-二氯乙酰胺-1-对-硝苯基-1,3-丙二醇)是惟一已知是有芳族硝基化合物性质的抗菌素。如把氯霉素的水溶液和氯化鈣与锌一起温热,其硝基易于轉化为亚硝基。
这样从氯霉素所产生的亚硝基化合物,在醋酸溶液中和α-萘胺縮合,产生一种紫色的偶氮染料(参考安替比林试验法):
此处所示的試驗法,系根据于(1)及(2)的实現。
操作手续 用一微量試管,把固体試样少許或試液一滴用10%氯化鈣溶液2滴及鋅粉数毫克处理。这个混合物在水浴中温热二分钟后,用5%α-萘胺的醋酸溶液二滴处理,再继续加热二分钟。如有氯霉素存在,就現出深浅不等的紫色,颜色的深度决定于其存在量。
鉴定限度:10微克 氯霉素
链霉素及氯霉素和二氫化链霉素不同,用8-羟基喹啉-釩的苯溶液处理时,有决定性的伯醇反应。因此,这个試驗法(苯层变红)可用来鉴定氯霉素。鉴定限度为10微克氯霉素。
氯霉素也可通过-NO2基团或仲醇基团或多卤化合物的試驗法进行鉴定。